虎源猫瘟热病毒VP2蛋白基因在毕赤酵母中的表达

摘要：

克隆了虎源猫瘟热病毒VP2蛋白基因并首次在Pichia pastoris酵母中进行了分泌表达.用特异性引物从虎源FPV中扩增出VP2基因,将其克隆到pGEM-T载体中,得到重组质粒pTVP2进行测序.用EcoR I和Not Ⅰ双酶切pTVP2,回收目的基因VP2片段将其定向克隆到pPICZaA中,构建出重组质粒pPICZaAVP 2.将pPICZaAVP 2用Sac Ⅰ内切酶线性化后,电转化毕赤酵母细胞GS115,PCR法筛选阳性重组酵母,并用1%甲醇诱导表达.结果在重组酵母菌培养物上清中经SDS-PAGE检测到相对分子量约为32kD的重组蛋白,Western-blotting证实该重组蛋白可以与FPV多克隆抗体发生特异性血清学反应,表明重组VP2蛋白具有正确的空间构象,有望作为虎FPV感染的诊断和免疫预防用抗原.

关键词：猫瘟热病毒、VP2蛋白基因、毕赤酵母、表达

所属期刊栏目：33

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2006-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：29-32