抗肉毒毒素A人源单链抗体在酵母细胞中的分泌表达

摘要：

将特异肉毒抗毒素基因克隆入载体pPIC9k,G418抗性加压筛选阳性整合克隆,在毕赤酵母细胞GS115中进行分泌表达.获得了稳定分泌表达ScFv的工程菌,SDS-PAGE分析可见,目的蛋白分子量约为26 kD,通过放大体积来探索重组抗毒素的诱导表达条件及纯化工艺,结果发现,1%甲醇诱导后72～84 h,目的蛋白的表达达到高峰,占酵母培养上清中总蛋白的15%以上,经两步层析纯化,目的蛋白纯度可达95%.竞争活性测定结果表明,重组抗毒素在体外具有良好的活性,可竞争肉毒抗毒素马血清与毒素的特异结合.

关键词：人源单链抗体、分泌表达、纯化、毕赤酵母

所属期刊栏目：32

分类号：Q786;R392.11(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2002CB513205

在线出版日期：2005-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：50-53