E83V对扩展青霉脂肪酶最适作用温度的影响

摘要：

利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)基因作了体外定点突变,获得了最适作用温度有所提高的突变体.含突变基因的重组质粒pPIC3.5K-lip-E83V在Pichiapastoris GS115中表达.对突变体表达产物PEL-E83V-GS与野生型表达产物PEL-GS作了比较:前者最适作用温度为45℃,比野生型提高了5℃;其热稳定性基本不变;突变体在37℃下的表达量为188 U/mL,约为野生型的80%.最适作用温度的提高可能是由于83位亲水性的Glu用疏水性的Val取代,增加了脂肪酶表面的疏水作用,使其在高温下更适于与底物的结合.

关键词：扩展青霉碱性脂肪酶、定点突变、最适作用温度

所属期刊栏目：32

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金B0120001

在线出版日期：2005-04-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：85-89