茉莉C病毒侵染性克隆的构建及CP基序分析

摘要：

[目的 ]构建茉莉C病毒(JaVC)福建分离物基因组全长cDNA侵染性克隆,克隆9省JaVC分离物的CP基因并比较分析基序差异,调查JaVC在我国茉莉产区的分布和传播情况.[方法]提取JaVC检测呈阳性的茉莉叶片总RNA,以反转录后的cDNA为模板扩增获得JaVC基因组全长序列并构建全长cDNA克隆pXT-JaVC-FJ;同时构建了外壳蛋白(coat protein,CP)融合红色荧光蛋白mCherry的克隆(pXT-JaVC CP-mCherry).利用农杆菌浸润法侵染本生烟,通过RT-PCR检测法和激光共聚焦扫描显微镜观察法验证JaVC侵染性.克隆其他8省JaVC分离物的3'末端包含CP的片段并测序分析CP基序差异.通过田间调查明确JaVC在茉莉上的发生情况和其传播介体.[结果]pXT-JaVC-FJ浸润本生烟可引起系统侵染,说明该克隆具有侵染活性.所有JaVC分离物的CP均编码296个氨基酸,JaVC中国台湾分离物的CP与各分离物核苷酸序列相似性为 82.27％-91.36％,与广东分离物相似性最高;氨基酸序列相似性为92.23％-96.82％,与云南分离物相似性最高;各分离物CP的氨基酸序列在32-35位点上差异显著,具有6种不同的氨基酸基序排列,分别为SEHA、GENA、REGT、SENA、GGDA和GGNA.田间调查显示,JaVC在中国茉莉植株上广泛分布且可在蓟马中检测到JaVC.[结论]成功构建了 JaVC-FJ的侵染性克隆,这为该病毒的基因功能、致病机理等研究奠定了基础;通过我国茉莉产区JaVC的发生及变异情况分析,为JaVC引起的病毒病的防治提供了理论依据.

关键词：茉莉C病毒、外壳蛋白、侵染性cDNA克隆

所属期刊栏目：62

分类号：Q78;S432.41;S855.3

资助基金：福建省自然科学基金项目;国家自然科学基金

在线出版日期：2022-10-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：3813-3824