NDV诱导HeLa细胞发生核糖体应激及对翻译起始复合体的影响
[目的]研究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)HBUN/LSRC/F3株(以下简称NDV F3)诱导宫颈癌细胞(HeLa)发生核糖体应激后对eIF2α介导的翻译起始复合体eIF4F的调控作用.[方法]流式细胞术及CCK-8检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测c-Myc基因表达;流式细胞术分析细胞周期;Western blotting 技术检测 c-Myc、RPS7、Bcl-2、NP、eIF4E 及 eIF2α 蛋白的表达;Western blotting 和免疫荧光染色技术检测NP、eIF4E蛋白定位.[结果]与阴性对照组相比,NDV F3抑制HeLa细胞增殖并诱导细胞凋亡.细胞周期中G0/G1期出现停滞,c-Myc表达呈时间依赖性抑制,c-Myc与Bcl-2蛋白表达量在0-48 h内逐渐下降,NP蛋白在24 h时生成并逐渐增加,RPS7、eIF4E和eIF2α蛋白含量在0-48 h内呈先增加后降低趋势.Western blotting定位分析及激光共聚焦显微镜结果显示NP蛋白主要存在细胞质中,NP与eIF4E存在共定位现象.[结论]NDV F3诱导HeLa细胞凋亡并引发核糖体应激反应,NP与eIF4E相互作用而抑制eIF2α介导的翻译起始复合体eIF4F形成,阻断其与宿主mRNA之间的联系,同时促进NDVF3mRNA的翻译,最终造成宿主蛋白翻译抑制.
新城疫病毒、核糖体、应激、宫颈癌
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R737.9;S852.65;Q959.117
河北省自然科学基金;河北省高等学校科学技术研究项目;张家口市应用基础研究;人才培养计划
2022-10-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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