Leifsonia sp.ZF2019中一种新型耐木糖β-木糖苷酶的表达与特征

摘要：

[目的]从栀子灰蝶幼虫分离的Leifsonia sp.ZF2019菌株中克隆表达出一种新型β-木糖苷酶Xy14900,并研究其酶学性质,以期为开发适用于工业生产的β-木糖苷酶提供参考.[方法]采用生物信息学分析技术分析Leifsonia sp.ZF2019菌株的β-木糖苷酶Xy14900基因并在大肠杆菌中表达了该基因,纯化并研究了其酶学性质.[结果]Xy14900与GH3家族的β-葡萄糖苷酶同源性高,但带有β-木糖苷酶结构域,可特异性水解对硝基苯基β-D-吡喃木糖普(pNPX),是一种新型β-木糖苷酶.酶学特性分析显示,Xy14900在45℃和pH 7.0的条件下酶活性最高,且在pH 6.0-9.0的范围内孵育14h,仍保持80％以上的酶活力.除Cu2+外,其他金属离子(2.5 mmol/L)对Xy14900酶活力无明显影响,且对低浓度有机溶剂(5％V/V)有较强耐受性.此外,在20％(W/V)NaCl或100 mmol/L木糖溶液中Xy14900的酶活性仍高于50％,表现出较好的盐和木糖耐受性.动力学参数分析显示,Xy14900的Km值、Vmax值和木糖抑制常数Ki值分别为0.80 mmol/L、36.10 U/mg和150.12 mmol/L.特别地,Xy14900能够很好地降解木二糖、木三糖.[结论]Xy14900具有良好的pH稳定性、木糖及盐耐受性,能够较好地应用到半纤维素降解和其他工业生产中.

关键词：Leifsonia sp.ZF2019、GH3糖苷水解酶、β-木糖苷酶、盐耐受性、木糖耐受性

所属期刊栏目：62

分类号：Q786;TS222;Q93-331

资助基金：大学生创新创业训练计划项目;浙江省自然科学基金

在线出版日期：2022-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：1452-1463