两端融合表达几丁质结合结构域提高几丁质酶抗真菌活性

摘要：

[目的]通过两端融合表达几丁质结合结构域来提高几丁质酶的活性和生物防治植物病原真菌能力.[方法]以苜蓿链霉菌(Streptomyces alfalae) ACCC40021中唯一的GH19家族几丁质酶为模板,构建两端融合表达几丁质结合结构域的几丁质酶,并进行原核表达;利用3,5-二硝基水杨酸法(DNS)测定几丁质酶活.[结果]成功构建了CatDChiB(催化结构域)、rChiB(含N-端几丁质结合结构域)、DChBDChiB(含两端几丁质结合结构域)三种形式的酶,并在大肠杆菌中得到了高效表达;与CatDChiB和rChiB相比,DChBDchiB显著地提高了对α-几丁质、胶体几丁质和黑曲霉几丁质的结合能力和活性;同时增强了其对病原真菌长枝木霉的抑制作用.[结论]两端融合表达几丁质结合结构域是简单有效的提高几丁质酶活性及抗真菌活性的策略.

关键词：碳水化合物结合模块(CBMs)、几丁质结合结构域(ChBD)、苜蓿链霉菌(Streptomyces alfalae)、几丁质酶、植物真菌病害

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资助基金：国家重点研发计划2017YFD0201100;河北省留学人员科技活动项目优秀类C2015005015;农业部饲料生物技术重点实验室开放基金

在线出版日期：2019-05-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：762-770