定量蛋白质组分析蚯蚓血红蛋白样蛋白MSMEG_3312介导的分枝杆菌耐红霉素机制
[目的]细菌耐药机制是个复杂的机制,系统生物学是系统性揭示耐药机制的有力研究手段.我们课题组前期研究结果显示,蚯蚓血红蛋白样蛋白msmeg_3312基因敲除后能够增加耻垢分枝杆菌对红霉素的耐药性,本文系统研究MSMEG_ 3312参与红霉素耐药性形成的机制.[方法]首先纯化MSMEG_3312蛋白,利用光谱及圆二色谱描述MSMEG-3312蛋白.利用定量蛋白质组学的方法比较分析敲除菌株Δmsmeg_3312与野生型菌株mc2155蛋白表达的差异,并通过qRT-PCR进行验证.利用红霉素ELASA试剂盒测定Δmsmeg_3312与mc2155的胞内药物浓度.[结果]光谱及圆二色谱分析确定MSMEG_ 3312是蚯蚓血红蛋白样蛋白.定量蛋白质组学分析发现,红霉素未处理的条件下,相比于野生型菌株mc2155,敲除菌株Δmsmeg_3312有包括3种转运蛋白在内的8种蛋白表达水平上调,14种蛋白表达下调;而红霉素处理后,Δmsmeg_3312中有448种蛋白差异表达,其中有11种转运蛋白表达上调,26种蛋白与氨基酸合成通路相关.胞内药物浓度检测显示敲除菌株Δmsmeg_3312的胞内红霉素浓度显著低于野生型菌株.[结论]蚯蚓血红蛋白样蛋白MSMEG_3312调控改变了细菌对红霉素药物处理的反应网络,其介导的红霉素耐药是一种集合抗生素耐受机制.
定量蛋白质组、蚯蚓血红蛋白样蛋白、MSMEG_3312、分枝杆菌、红霉素、耐药性
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2019-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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