双功能域β-折叠桶碱性植酸酶蛋白序列分析与酶学特性
[目的]表达、纯化来源于Bacillus sp.HJB17的双功能域β-折叠桶碱性植酸酶 (phy HT), 并对该酶进行蛋白序列以及酶学特征分析, 为该酶的广泛应用奠定基础.[方法]应用生物信息学技术, 对phy HT蛋白序列进行了生物信息学分析.表达、变复性、分离纯化得到具有酶活性的可溶性phy HT蛋白溶液, 通过硫酸亚铁-钼蓝法对phy HT的酶学特性进行了研究.[结果]序列分析结果显示, phy HT由633个氨基酸组成, 含有2个植酸酶结构域, 属于典型的BPP植酸酶, 相对分子量 (MW) 为69321.68 Da, 理论等电点为5.37, 为亲水性蛋白.二级结构中, phy HT中α-螺旋 (helix) 、β-片层 (sheet) 占主要的比例, 高级结构以β片层形成的桶状结构为主.酶学性质研究表明, 该酶的最适反应温度为35°C, 在45°C以下比较稳定.最适的p H为8.0, 在p H为6.0–12.0条件之间比较稳定.低浓度的Ca2+以及Mg2+对酶活性有促进作用, Fe2+、Mn2+、Zn2+、Cu2+、Ni2+等金属离子对酶活性有抑制作用.[结论]本研究成功对phy HT进行了蛋白序列分析以及酶学性质研究, phy HT属于碱性植酸酶, 酶活性高、稳定性好, 在理论研究和工业生产方面均有很大应用价值.
β-折叠桶碱性植酸酶、生物信息学分析、酶学特性
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中央高校基本科研业务费专项资金2018ZY18, 2015ZCQ-LY-02;国家自然科学基金 31070651. Supported by the Fundamental Research Funds for the Central Universities2018ZY18, 2015ZCQ-LY-02;by the National Natural Science Foundation of China31070651
2018-10-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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