MehpH的生化与结构特性
[目的]本研究旨在系统探究环境因素对邻苯二甲酸单乙基己基酯水解酶(monoethylhexyl phthalate hydrolase,MehpH)活性的影响,模拟该酶的3D结构并分析活性中心氨基酸残基与底物之间的相互作用.[方法]根据标准的酶学实验验证了环境因素对酶活性的影响.该酶的基本结构分析由DNAMAN (2.1)分析所得,同时利用SWISS-MODEL对其3D模型进行预测,并通过PyMOL软件对相关结果作了可视化处理.Autodock工具,Swiss-Pdb以及PyMOL均用以酶与邻苯二甲酸单乙基己基酯(monoethylhexylphthalate,MEHP)的相互作用分析.[结果]该酶的初级结构与已报道Gordonia sp.P8219菌株中的酯类水解酶相似,该酶的最适温度与pH(分别为40℃和8.0)和菌株P8219有所不同;该酶在有机溶剂、洗涤剂和金属离子环境中表现出良好的稳定性;然而,其酶活受2 mol/L的Ni2+、Fe3+、Cu2+和Zn2+离子,1 mol/L苯甲基磺酰氟(PMSF),0.5 mol/L的对氧磷,l mol/L苯基醚(PGO),2 mol/L焦碳酸二乙酯(DEPC)和5 mol/L的毒扁豆碱所抑制.丝氨酸水解酶中高度保守五肽基序GXSXG与催化三联体HSD结构均存在于该酶的编码序列中.根据分子对接结果,Thr152与Ser230在水解酶与其模板之间也显得更为保守,且与MEHP联系较为紧密(分别为5.8 (A)和3.6 (A)),可能起着重要的催化作用.而MEHP与催化氨基酸残基Ser125、His291、Asp259并不十分靠近.[结论]YC-RL2中MehpH在有机溶剂、洗涤剂以及金属离子环境中具有稳定的生物活性,表明其具有良好的应用潜力.酶的结构及活性中心得到了初步的分析,对于催化机理及酶改造研究具有重要意义.
邻苯二甲酸单乙基己基酯、食碱戈登氏菌YC-RL2、生化特性、水解酶、结构特性
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the National Natural Science Foundation of China31540067,31170119;by the Basic Research Fund of CAAS 0042014011,0042012003,0042011006国家自然科学基金31540067,31170119;中国农科院基础研究基金0042014011,0042012003,0042011006
2018-04-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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