口蹄疫病毒结构蛋白VP1容忍外源标签的能力

摘要：

[目的]利用口蹄疫病毒的反向遗传操作技术,构建含不同外源标签口蹄疫病毒的全长克隆,鉴定口蹄疫病毒结构蛋白VP1容忍不同外源标签的能力.[方法]通过融合PCR技术,在FMDV O/HN/93全长感染性克隆的VP1 G-H环分别引入V5、TC12、KT3、3FLAG外源标签,构建全长质粒.全长质粒经Not Ⅰ线化后转染表达T7 RNA聚合酶的稳定细胞,拯救重组病毒.RT-PCR、序列测定、间接免疫荧光鉴定病毒,噬斑和一步生长曲线分析重组病毒的生物学特性.[结果]成功拯救到表达V5或KT3表位标签的重组病毒,未能拯救到表达TC12或3×FLAG的重组病毒.V5和KT3表位标签的插入均影响了口蹄疫病毒的复制能力.[结论]重组口蹄疫病毒的成功拯救为未来标记疫苗以及口蹄疫病毒作为表达载体等的研究奠定了基础.

关键词：口蹄疫病毒、结构蛋白、外源标签

所属期刊栏目：57

分类号：S18;TQ4

资助基金：甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目GNSW-2014-22;甘肃省青年科技基金计划1606RJYA256Supported by the Agricultural Biotechnology Research and Application Development Project of Gansu ProvinceGNSW-2014-22;by the Natural Science Foundation of Gansu Province1606RJYA256

在线出版日期：2017-06-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：659-666