红球菌R04苯甲酸转运相关膜蛋白RHOGL009301的生理功能
[目的]探究红球菌(Rhodococcus sp.) R04膜蛋白RHOGL009301的生理功能和突变菌株的代谢特性,确定该膜蛋白的生理功能与苯甲酸转运的关系.[方法]将RHOGL009301基因与绿色荧光蛋白基因在Rhodococcus erythropolis进行融合表达,Delta Vision观察该基因蛋白产物的定位.通过基因同源重组敲除RHOGL009301基因,并对比野生型菌株和缺陷型菌株在不同碳源培养下的生长情况.HPLC测定红球菌R04野生型菌株和缺陷型菌株代谢联苯和苯甲酸时细胞内外代谢物,分析不同生长条件下代谢物的浓度变化.[结果]RHOGL009301基因与绿色荧光蛋白基因在Rhodococcus erythropolis中实现共表达,并定位在细胞膜上.获得了RHOGL009301基因的缺陷型菌株R04ΔMP,与野生型菌株相比,缺陷型菌株在联苯和苯甲酸培养条件下的生物量明显降低,生长速度减慢.HPLC分析表明RHOGL009301基因的缺失抑制了苯甲酸的转运.[结论]膜蛋白RHOGL009301是苯甲酸代谢和转运相关的蛋白,基于序列同源性分析,该膜蛋白是一种新型的苯甲酸转运蛋白.
红球菌(Rhodococcus) sp.R04、苯甲酸、膜蛋白、转运蛋白
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TS2;X70
山西省自然科学基金2014011030-3Supported by the Natural Science Foundation of Shanxi Province 2014011030-3
2017-05-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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