FtsZ(236-245)区域的两性螺旋特性对大肠埃希氏菌FtsZ组装和功能的影响

摘要：

[目的]探索大肠埃希氏菌(Escherichia coli,E.coli) FtsZ (236-245)结构域两性螺旋特性对FtsZ组装和FtsZ-FtsA相互作用的影响.[方法]利用分子克隆和定点突变技术,构建FtsZ及其突变体表达载体,亲和纯化获得相应目标蛋白;通过同源重组和P1转导构建QN23-QN29菌株;利用活细胞成像观察FtsZ及其突变体的胞内定位特点;膜蛋白分离和Western blot分析FtsZ突变体的膜结合特性变化;非变性胶分离和体外聚合分析检测定点突变对FtsZ单体组装特性的影响;免疫沉淀和Far Western blot实验检测FtsZ/FtsZ*-FtsA间的相互作用.[结果]FtsZE237A/K和FtsZE241A/K突变体的功能活性降低、各突变体在E coli内不能正确定位和形成功能性Z环;E237A/K和E241A/K位点突变致各突变体聚合能力降低、FtsZ*-FtsA的相互作用减弱和FtsZ的膜结合特性变化.[结论]E237和E241是影响FtsZ (236-245)区域两性螺旋特性和FtsZ组装及FtsZ-FtsA相互作用的重要氨基酸.

关键词：大肠埃希氏菌(E.coli)、FtsZ突变体(FtsZ*)、FtsA、两性螺旋

所属期刊栏目：57

分类号：TN8;TB3

在线出版日期：2017-05-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共13页

页码：513-525