用小鼠模型分析可溶性表达结核分枝杆菌Ag85A的免疫原性

摘要：

[目的]可溶性表达结核分枝杆菌Ag85A蛋白,并评价其免疫原性.[方法]利用冷休克表达质粒和含有伴侣质粒的大肠杆菌对Ag85A蛋白进行可溶性原核表达,并进行纯化与鉴定,通过C57BL/6小鼠模型对Ag85A蛋白的免疫原性,包括诱导机体特异性体液免疫应答和细胞免疫应答水平进行分析.[结果]重组菌诱导后裂解上清中检测到可溶性Ag85A蛋白的表达,经过亲和层析纯化收获了纯度在90％以上的Ag85A蛋白,Westem blot鉴定显示其具有较好的免疫反应性.Ag85A蛋白免疫小鼠后,血清中可以检测到高水平的IgG抗体效价,其中IgG2b水平要高于IgG1.通过特异性多肽、蛋白刺激脾脏和腹股沟淋巴结细胞可分泌高水平的IFN-γ、 TNF-α等Th1型细胞因子.[结论]实现了Ag85A蛋白的可溶性表达,免疫特性评价显示Ag85A蛋白可诱导机体产生强烈的特异性体液免疫应答及Th1型的细胞免疫应答,从而为其进一步免疫学功能的研究奠定了重要基础.

关键词：结核分枝杆菌、Ag85A、可溶性表达、免疫原性

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资助基金：Supported by the National Basic Research and Development Program of China 973 Program 2012CB518805, by the Research and Development Program of Jiangsu BE2015343, by the NSF of Yangzhou YZ2014027, by the National Natural Science Foundation of China 31201882, and by the Priority Academic Program Development of Jiangsu Higher Education Institutions;国家"973计划"2012CB518805;江苏省重点研发计划BE2015343;扬州市自然科学基金YZ2014027;国家自然科学基金31201882;江苏高校优势学科建设工程资助项目

在线出版日期：2016-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：804-813