不同条件下两株溶磷菌溶磷量及葡萄糖脱氢酶基因表达与酶活分析
[目的]获得大豆根际土壤中溶磷能力较强的菌株,明确在菌株溶磷过程中葡萄糖脱氢酶(GDH)的作用特点及其基因的表达水平.[方法]利用溶磷圈方法分离与纯化溶磷菌株,采用Vitek2系统和16SrRNA序列分析菌株的分类地位;测定2菌株的溶磷量、GDH活性,并根据GDH基因的保守区序列设计引物,克隆GDH基因,利用实时荧光定量PCR测定不同条件下基因的相对表达量.[结果]筛选出2株具有较强溶磷能力的溶磷菌,分别鉴定为Pseudomonas sp.和Enterobacter sp.,2菌株最高溶磷量分别为558 μg/mL和478 μg/mL;成功地克隆了2株溶磷菌的GDH基因,片段大小分别为2007 bp和2066 bp;2菌株在不同磷源、不同pH值培养基中GDH活性及基因表达量不同,菌株wj1在高磷条件下基因表达量最高,磷胁迫条件下基因表达量较低,而wj3在不同磷源条件下GDH基因表达量都较低.且GDH基因表达量及酶活的变化与wj3菌株溶磷量没有直接的关系.[结论]从大豆根际土壤中分离获得溶磷能力较强的菌株Pseudomonas sp.wj1和Enterobacter sp.Wj3,GDH活性及基因表达在2株菌溶磷过程中具有不同的作用特点,2菌株溶磷机制不完全相同.
溶磷菌、溶磷量、葡萄糖脱氢酶、Pseudomonas sp.、Enterobacter sp.
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国家自然科学基金31201687Supported by the National Natural Science Foundation of China 31201687
2016-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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