嗜酸嗜热古菌Sulfolobus acidocaldarius编码尿嘧啶DNA糖苷酶表达,纯化与酶学特征
[目的]嗜高温微生物面临dC脱氨基生成dU损伤的巨大压力,鉴定嗜酸嗜热古菌S.acidocaldarius来源的尿嘧啶DNA糖苷酶(UDG)切除dU损伤的酶学活性.[方法]重组表达来源于S.acidocaldarius的Ⅳ和Ⅴ型UDG,经亲和纯化得到电泳纯重组蛋白.然后利用人工合成的dU (deoxyuracil)修饰寡核苷酸片段作为底物,体外鉴定两种重组UDG的酶学特性.[结果]来源于S.acidocaldarius的Ⅳ和Ⅴ型重组UDG具有相似的酶学特性.Ⅳ型UDG催化效率更高,比活性是Ⅴ型重组UDG的750倍左右.作为来自嗜热微生物的蛋白,S.acidocaldarius的Ⅳ和Ⅴ型UDG的最适反应温度为65-75℃.[结论]Ⅳ型UDG比Ⅴ型UDG水解dU碱基和脱氧核糖之间糖苷键的能力更强.
古菌、嗜酸嗜热硫化叶菌、dU碱基损伤、DNA修复、尿嘧啶DNA糖苷酶
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Q936(微生物学)
国家自然科学基金J1210047,上海市自然科学基金12ZR1413700Supported by the National Natural Science Foundation of China J1210047 and by the Shanghai Municipal Natural Science Foundation 12ZR1413700
2015-09-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1036-1041
