南极海洋产耐有机溶剂变性剂氧化剂蛋白酶链霉菌菌株XE-1的初步鉴定及酶学性质
[目的]从南极海泥土壤中分离得到一株高产蛋白酶的放线菌(XE-1),对所产蛋白酶进行纯化以得到具有特殊性质的酶产物.[方法]通过对XE-1的生理生化和16S rRNA基因序列分析,初步将其确定为灰红链霉菌的变种.利用乙醇沉淀、离子交换、凝胶等方法纯化后,利用冻干浓缩获得其胞外蛋白酶,用SDS-PAGE测定分子量并进行性质表征.[结果]得到一种对高浓度的有机溶剂、变性剂、氧化剂耐受的,表观分子量为14 kDa的碱性丝氨酸蛋白酶,进一步分析,其最适pH 8.2,温度为55℃,米氏常数Km和Vmax分别为1.9 mg/mL和973 u/mL.此蛋白酶活性于25%的有机溶剂为50%-180%的初始活性;在不同浓度的氧化剂中为110%-140%的初始活性,在0.2 mol/L到4 mol/L的变性剂中表现为100%-150%的初始活性.[结论]从南极海洋链霉菌XE-1中分离得到一种耐有机溶剂、变性剂、氧化剂,大小约为14 kDa碱性蛋白酶,其特殊的酶学性质可用于工业生产或药学等领域.
极地海洋放线菌、低分子量蛋白酶、有机溶剂耐受、变性剂和氧化剂
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Q814(生物工程学(生物技术))
Supported by the Fundamental Research Funds for the Central Universities JKZD2013017;中央高校基础科研基金JKZD2013017
2015-04-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
311-320