鸡白痢沙门氏菌生物被膜形成相关基因rpoE的鉴定

摘要：

[目的]通过鸡白痢沙门氏菌基因表达和缺失株生物特性的测定,鉴定其生物被膜形成的相关σ因子.[方法]利用结晶紫染色定量法测定沙门氏菌生物被膜形成能力;通过触酶试验测定rpoS活性,确定rpoS基因依赖性和非依赖性生物被膜形成株;利用建立的荧光定量PCR方法比较rpoS基因非依赖株在指数期和生物被膜形成期6个σ因子的基因表达差异;运用Red同源重组系统构建所鉴定σ因子基因缺失株,并测定野生株和基因缺失株对于环境应激的抵抗力差异.[结果]鸡白痢沙门氏菌S6702能够形成生物被膜,触酶试验阴性,确定S6702为rpoS基因非依赖性生物被膜形成株;荧光定量PCR检测显示,培养4-24 h后S6702中rpoE基因表达量最高;与野生株相比,△rpoS缺失株保留了生物被膜形成能力,而△rpoE缺失株不能形成生物被膜.rpoS和rpoE基因缺失株对于环境应激的抵抗力均显著降低.[结论]在rpoS基因非依赖性生物被膜形成株中,rpoE基因为参与生物被膜形成调控的σ因子之一,这一发现可用于进一步研究沙门氏菌生物被膜形成的调控机制.

关键词：沙门氏菌、生物被膜形成、rpoS基因、rpoE基因、突变株

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分类号：Q935(微生物学)

资助基金：Supported by the Special Fund for Agro-Scientific Research in the Public Interest 20100312 by the Project Funded by the Priority Academic Program Development of Jiangsu Higher Education Institutions and by the Jiangsu Research Centre of Engineering and Technology for Prevention and Control of Poultry Disease BM2013450;公益性行业农业科研专项20130312;江苏高校优势学科建设工程;江苏省家禽疫病防控工程技术研究中心BM2013450

在线出版日期：2015-03-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：156-163