一株产卡拉胶酶细菌的分离鉴定及其酶学性质

摘要：

[目的]从红树林土壤腐叶中分离出能够产生卡拉胶酶的菌株,对其进行鉴定,并研究其酶学性质.[方法]利用以卡拉胶为唯一碳源的培养基,分离出产卡拉胶酶的菌株;通过形态学观察、16S rDNA序列分析对其进行种属鉴定;对该菌株所产卡拉胶酶进行纯化并采用DNS测酶活的方法测定酶学性质.[结果]从红树林土壤腐叶中分离出1株高产κ-卡拉胶酶的菌株ASY5,经鉴定该菌株为假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas sp.ASY5).纯化得到的κ-卡拉胶酶的分子量约为30 kDa;酶学性质试验表明,其最适反应温度和pH分别为60℃和7.5,在50℃以下酶的稳定性较好,在pH 7.0-9.0范围内酶活力较稳定,对κ-卡拉胶具有良好的底物特异性,以κ-卡拉胶为底物时Km值和Vmax值分别为2.28 mg/mL和147.06 μmol/(min· mg),Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Al3+等对酶活有显著的促进作用,而Ag+、Zni2+、Cd2+及SDS对酶活有强烈的抑制作用.[结论]分离到的细菌假交替单胞菌Pseudoalteromonas sp.ASY5产生的κ-卡拉胶酶在较高的温度和碱性条件下均具有较高的酶活性,为利用卡拉胶水解酶产生卡拉寡糖的研究和应用奠定了基础.

关键词：κ-卡拉胶酶、分离、鉴定、酶学性质

所属期刊栏目：55

分类号：Q814(生物工程学(生物技术))

资助基金：Supported by the Projects of Science and Technology Program of Xiamen City3502Z20120005 and by the Projects of Xiamen Southern Ocean Technology Center of China 13GZP004NF10;厦门市科技计划项目3502Z20120005;厦门南方海洋研究中心项目13GZP004NE10

在线出版日期：2015-03-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：140-148