羊毛硫细菌素bovicin HJ50修饰酶BovM双功能域单独催化活性鉴定
[目的]体外重建羊毛硫细菌素bovicin H J50修饰酶BovM双功能域(脱水酶与环化酶功能域)各自的催化活性,为深入了解BovM催化机制奠定基础.[方法]在大肠杆菌(Escherichia coli)中分别异源表达纯化BovM含脱水功能域的N端与含环化功能域的C端重组蛋白,构建体外反应体系,分别对其前肽底物BovA进行修饰,通过产物抑菌活性及MALDI-TOF MS分子量检测来鉴定两者的修饰活性;并通过体内体外两种方法检测双功能域蛋白之间的协同作用.[结果]BovM的N端脱水功能域及C端环化功能域分别具有脱水与环化活性,但双功能域重组蛋白之间没有协同作用.[结论]BovM双功能域均可独立行使各自的催化功能,但BovM的完整结构对其正常的催化活性非常重要.
羊毛硫细菌素、双功能酶、脱水、环化
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Q936(微生物学)
中国科学院知识创新重要方向项目KSCX2-EW-Q-14,KSCX2-EW-J-6;Supported by the Knowledge Innovation Program of the Chinese Academy of Sciences KSCX2-EW-Q-14,KSCX2-EW-J-6
2015-01-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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