定点突变提高N-酰基高丝氨酸内酯酶酶活和温度稳定性

摘要：

[目的]提高N-酰基高丝氨酸内酯酶(N-acylhomoserine lactonase,AiiA)酶活及温度稳定性.[方法]本研究基于AiiA同源蛋白的三维结构对AiiA进行定点突变,分析野生型AiiA及其突变蛋白酶活和湿度稳定性.[结果]野生型AiiA较不稳定,在45℃下温浴30 min,或4℃储存5d后均失去降解N-酰基高丝氨酸内酯(N-acylhomoserine lactone,AHL)的活性.但是突变AiiA蛋白(N65K,T195R和A206E)的酶活力较野生型AiiA均提高了20％以上,且4℃储存时间延长到7d.此外,突变株N65K比野生型AiiA对高温具有更强的耐受性,在45℃温浴后剩余酶活力达到45％以上,55℃温浴30 min后仍保留5.0％的酶活力.[结论]通过定点突变改造AiiA蛋白结构,提升了AiiA蛋白的酶活和温度稳定性.

关键词：N-酰基高丝氨酸内酯、N-酰基高丝氨酸内酯酶、酶学特性、定点突变

所属期刊栏目：54

分类号：Q814(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家“863计划“2011AA10A203;福建省自然科学基金2012J01123;福建省教育厅项目JK2012009;Supported by the National Programs for High Technology Research and Development of China 2011AA10A203,by the Projects from the Scientific Foundation of Fujian Province 2012J01123 and by the Education Department of Fujian JK2012009

在线出版日期：2014-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：905-912