禽致病性大肠杆菌毒力基因多重PCR方法的建立和应用

摘要：

[目的]建立禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)黏附相关基因、侵袭及毒素相关基因、抗血清存活相关基因及铁转运相关基因的多重PCR方法,实现禽致病性大肠杆菌毒力基因的简便、快速检测.[方法]根据GenBank公布的基因序列,设计合成18对特异性引物,通过条件优化,建立四组多重PCR体系,并通过模板倍比稀释检测各组多重PCR的灵敏性.利用多重PCR检测100株APEC毒力基因的分布,验证多重PCR方法的可行性.[结果]根据PCR扩增片段大小判定,上述四组多重PCR体系均能同时扩增出该组中的各个毒力基因,且灵敏度分别为:103 CFU、103 CFU、105 CFU、105 CFU细菌和1ng、1ng、10ng、10ng DNA.100株APEC的毒力因子检测结果显示,多重PCR和单基因PCR结果一致.[结论]建立的四组多重PCR方法能够简便、快速地检测禽致病性大肠杆菌的毒力基因,可用于毒力基因的鉴定以及流行病学调查.

关键词：禽致病性大肠杆菌、毒力基因、多重PCR、检测

所属期刊栏目：54

分类号：Q93(微生物学)

资助基金：国家自然科学基金81201266,31370045,31072161;公益性行业农业专项:家禽主要细菌病防控技术研究与示范201303044 Supported by the National Natural Science Foundation of China 81201266,31370045,31072161 and by the Chinese Special Fund for Agro-scientific Research in the Public Interest 201303044

在线出版日期：2015-08-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：696-702