嗜肺军团菌类真核效应蛋白LegK3抑制酿酒酵母的生长并影响其小泡运输途径

摘要：

[目的]为了探索嗜肺军团菌类真核效应蛋白LegK3的功能,并进一步筛选得到其在宿主细胞内的作用靶点,我们利用酿酒酵母作为替代模型研究LegK3对宿主细胞的毒力效应,并针对其作用途径进行了初步分析.[方法]设计引物完整扩增LegK3、RalF、LidA的ORF,其中已知效应蛋白RalF、LidA基因作为对照实验组;扩增片段与酵母表达载体pESC-HK连接构建成重组载体,转化酿酒酵母菌株W303-1A,使用含2％半乳糖的选择培养基进行诱导培养,分别观察酵母细胞的生长抑制和CPY延迟情况;提取诱导前、后的酵母菌体总蛋白用c-myc抗体检测效应蛋白的表达情况;用anti-PGK、anti-CPY抗体检测酿酒酵母CPY的延迟情况.[结果]表达LegK3的酵母菌株出现了生长抑制的现象,并且CPY的成熟受到延迟影响.[结论]LegK3的异源表达能够抑制酿酒酵母的生长并延迟其囊泡蛋白CPY的成熟,推测LegK3可能通过作用于小泡运输途径来抑制真核宿主细胞的生长和分裂,以维持适合嗜肺军团菌繁殖的稳定胞内环境.

关键词：嗜肺军团菌、效应蛋白、LegK3、酿酒酵母

所属期刊栏目：54

分类号：Q816(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金30970123;the National Natural Science Foundation of China30970123

在线出版日期：2014-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：417-423