结核分枝杆菌ESX-1分泌蛋白ESAT-6增强巨噬细胞吞噬功能

摘要：

[目的] 研究结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)分泌蛋白ESAT-6(early secreted antigenic target of 6 kDa)对巨噬细胞吞噬功能的影响.[方法] 用重组质粒pFLAG-ESAT-6和pFLAG-EGFP转染RAW264.7细胞,经G418筛选,PCR、RT-PCR和Western blot鉴定,获得稳定表达flag-ESAT-6和flag-EGFP的RAW细胞系,然后用流式细胞术观察各稳转细胞系吞噬荧光微球的能力,并用共聚焦显微镜和菌落计数法检测稳转细胞系吞噬大肠杆菌(Escherichia coli)的能力.[结果] 获得了稳定表达flag-ESAT-6的RAW-E6细胞系和表达flag-EGFP的RAW-EGFP细胞系;流式细胞术检测结果表明RAW-E6吞噬荧光微球的能力显著强于野生型细胞系RAW264.7和对照细胞系RAW-EGFP;菌落计数和激光共聚焦分析表明RAW-E6细胞系吞噬E.coli的能力也显著强于RAW264.7和RAW-EGFP.[结论] 通过胞内表达发现结核分枝杆菌分泌蛋白ESAT-6能够增强巨噬细胞的吞噬功能,这将为深入理解结核分枝杆菌的致病机制提供新的思路.

关键词：结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)、ESAT-6、巨噬细胞、吞噬作用

所属期刊栏目：53

分类号：R37(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金30972772;北京市自然科学基金5122035;the National Natural Science Foundation of China30972772;by the Beijing Natural Science Foundation5122035

在线出版日期：2013-10-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：860-866