新城疫病毒基质蛋白与禽细胞核磷蛋白B23.1在HEK-293T细胞中的相互作用
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新城疫病毒基质蛋白与禽细胞核磷蛋白B23.1在HEK-293T细胞中的相互作用

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[目的]探讨新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)基质(matrix,M)蛋白和禽细胞核磷蛋白B23.1在HEK-293T细胞中的相互作用.[方法]分别参照GenBank中NDV JS/5/05/Go株全基因序列(JN631747)和禽细胞核磷蛋白B23.1基因序列(NM_205267),设计、合成扩增M基因和B23.1基因的引物,利用RT-PCR扩增出M基因和DF1细胞的B23.1基因,分别克隆至真核表达载体获得重组表达质粒pEGFP-M、pCMV-HA-M和pDsRed-B23.1;将pEGFP-M和pDsRed-B23.1共转染HEK-293T细胞,利用荧光显微镜观察M蛋白与B23.1蛋白的共定位;利用免疫共沉淀(Co-IP)技术进一步验证两种蛋白的相互作用.[结果]Western blot结果表明构建的重组质粒在转染的HEK-293T细胞中正确表达;荧光显微镜观察显示M蛋白与B23.1蛋白在核仁具有共定位特征;Co-IP进一步证实两者能发生相互作用.[结论]NDV M蛋白与禽细胞核磷蛋白B23.1存在相互作用,M蛋白可能通过与B23.1蛋白的相互作用进入核仁.

新城疫病毒、基质蛋白、核磷蛋白B23.1、蛋白相互作用

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S852(动物医学(兽医学))

教育部"长江学者和创新团队"发展计划资助项目IRT0978;国家蛋鸡产业技术体系建设专项资金资助nycytx-41-G07;江苏高校优势学科建设工程资助项目;公益性行业农业科研专项经费201303033;the Program for Changjiang Scholars and Innovative Research Team in UniversityIRT0978;by the Earmarked Fund for Modern Agro-industry Technology Research Systemnycytx-41-G07;by the Priority Academic Program Development of Jiangsu Higher Education Institutions and by the Chinese Special Fund for Agro-scientific Research in the Public Interest201303033

2013-08-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共7页

730-736

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微生物学报

0001-6209

11-1995/Q

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2013,53(7)

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