68株北极产蛋白酶菌株的筛选、鉴定以及部分酶学性质
[目的]从北极海水样品中分离产蛋白酶细菌,并对其进行初步的分类鉴定,为低温蛋白酶的低温适应性及其应用研究奠定基础.[方法]通过酪蛋白筛选培养基低温培养的方法从北极水样中分离出68株产蛋白酶细菌,采用16S rRNA基因PCR-RFLP(限制性酶切多态性)方法及传统的表型特性分析对所分离纯化的菌株进行分类,每种细菌类型各取1株代表菌株进行16S rRNA基因序列测定、GenBank数据库blast分析以及通过DNAMAN软件进行系统进化树分析.对代表菌株的蛋白酶酶学性质进行初步研究.[结果]68个菌株可归为3种类型(54.41％、42.65％和2.94％),分别以菌株6、11和52为代表菌株.16S rRNA基因序列分析结果表明,菌株11与比目鱼黄杆菌(Chryseobacterium scophthalmum)具有98.24％的同源性；菌株52与嗜根寡养单胞菌(Stenotrophomonas rhizophila)具有98.55％的同源性；菌株6与Stenotrophomonas rhizophila具有96.50％的同源性,可能为该属的新物种.对3种类型代表菌株进行表型性状研究显示,菌株6、1 1和52为革兰氏阴性、直杆状、不产胞外脂肪酶和淀粉酶,具有强的蛋白酶活性.菌株6的蛋白酶最适酶活温度为55℃,最适宜pH为6.7；菌株1 1的蛋白酶最适酶活温度为40℃,属于低温酶,最适酶活pH约为8.5；菌株52的蛋白酶最适酶活温度为65℃,最适酶活pH为7.4.[结论]本文首次报道了Stenotrophomonas和C hryseobacterium的菌株在北极海水样品中的分布,充实了极地产蛋白酶菌的种属分布多样性,为后续低温蛋白酶的研究和应用奠定了基础.
北极、蛋白酶、Stenotrophomonas、Chryseobacterium
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Q814(生物工程学(生物技术))
国家自然科学基金41006117;国家海洋公益性行业专项经费项目200805064,201205013;华侨大学高层次人才科研启动项目12BS206;the National Natural Science Foundation of China41006117;by the Marine Public Welfare Project200805064,201205013;by the Research Foundation for High-level Talents of Huaqiao University12BS206
2013-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
702-709
