紫细菌光合色素指纹图谱的建立与色素分析
[目的]探索快速高效的色素样品制备方法；为建立紫细菌全色素TLC和HPLC标准指纹图谱和数据库提供研究方法和思路；为色素代谢与调控等研究提供快速的色素分析方法.[方法]选择沼泽红假单胞菌(Rhodopesudomonas palustris CQV97)为材料,采用改良丙酮甲醇提取法、TLC重复展层法、图像灰度分析法、吸收光谱法、HPLC和MS法进行色素分析.[结果]甲醇或丙酮可选择性地提取样品的细菌叶绿素和类胡萝卜素,通过对丙酮甲醇法的改良,使色素提取总量提高了13.5％.建立了CQV97菌株全色素的TLC和HPLC指纹图谱,二者均含有11种色素组分.图像灰度分析法估算了TLC指纹图谱各色素组分的表观相对含量.以TLC图谱的各色素组分为外标物,明确了HPLC图谱中各色素组分的保留时间(Rt)与TLC图谱中各色素组分的迁移率(Rf)之间的对应关系.结合色素代谢途径、光谱分析和MS,定性分析了指纹图谱中11种色素组分.TLC或HPLC分析结果表明,理论样品与对照样品色素组分和含量一致,而实际样品与对照样品色素组分一致,但含量不同,重复测定3次,样品中色素相对含量的RSD均小于5％.[结论]改良的丙酮甲醇法可以快速高效地提取光合细菌的色素.采用TLC重复展层法和HPLC法建立的全色素指纹图谱色素组成一致,重复稳定性好,各具特色.TLC和HPLC两种指纹图谱分析方法均能进行光合色素的快速分析,适合于紫细菌色素合成途径中主要积累色素的组分和含量变化规律研究.
紫细菌、类胡萝卜素、细菌叶绿素、沼泽红假单胞菌
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Q93-3(微生物学)
国家自然科学基金31070054;福建省自然科学基金2010J01209;中国科学院城市环境与健康重点实验室基金KLUEH201005
2012-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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