霍乱弧菌中调控aphB的基因筛选及其功能
[目的]筛选霍乱弧菌C6706-中调控LysR家族蛋白AphB表达的基因.[方法]将霍乱弧菌埃尔托型菌株C6706-aphB启动子区克隆到2个报告质粒pBBRLux和pKP302上,并将其导入霍乱弧菌C6706-中,以此作为出发菌株.利用出发菌株与转座子pSC123接合构建LZV630-302转座子随机突变文库,通过测定化学发光强度检测aphB启动子的表达水平,筛选aphB表达受影响的突变株.利用随机PCR方法检测转座子插入位点,并测序比对分析基因.[结果]从7个转座子库中(共约4万个突变株)得到能影响aphB表达(均导致下降)的2株突变株T1和T2.测序比对发现T1中转座子插入在vc1585读码框内,T2中转座子插入在距vc1602基因末端7 bp处.[结论]获得aphB表达改变的突变株,基因vc1585和vc1602可能直接或间接影响aphB表达,为进一步研究aphB表达调控影响因素奠定了基础.
霍乱弧菌、aphB、基因调控
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Q933(微生物学)
国家自然科学基金30830008
2012-05-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
256-261