大肠杆菌44277(02:K1)中rmlB基因功能
[目的]确定rmlB基因在大肠杆菌(02:K1)L-型鼠李糖合成中的作用.[方法]将基因rmlB进行原核表达并测定酶活;用同源重组的方法将rmlB基因敲除,分析表型变化,并运用质谱,以及核磁共振等手段分析脂多糖0侧链的结构,以确定rmlB在O抗原合成中的作用.[结果]成功对rmlB基因进行了表达并测定了重组蛋白的酶活,确定蛋白RmlB具有dTDP-D-glucose 4,6-dehydratase活性.成功构建了rmlB基因缺失突变株,对突变株进行表型分析发现突变株的表型与野生株相比无变化.对突变株分析发现突变株中的O抗原仍含有L-型鼠李糖,说明在该菌株中可能存在RmlB的同功能酶或者存在其它的L-型鼠李糖合成途径.[结论]rmlB基因编码的蛋白具有dTDP-D-glucose 4,6-dehydratase活性但此基因对于L-型鼠李糖的合成不是必需的.
大肠杆菌、L-鼠李糖、合成
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Q935(微生物学)
国家“863计划”2006CB504400
2011-12-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1168-1176