糖蛋白G基因在基因组P-M位的插入重组表达对狂犬病毒Flury LEP致病力的影响
[目的]研究狂犬病病毒Flury鸡胚低代毒株(Flury LEP)在基因组P-M位增加糖蛋白基因(G基因)的重组表达对病毒致病力的影响.[方法]利用反向遗传操作技术,构建了P、M基因之间额外插入G基因的重组狂犬病病毒Flury LEP株(rLEP-PGM),并对重组病毒的生物学特性及对小鼠的致病性进行了初步研究.[结果]亲本株和重组病毒具有相似的生长特性,LEP和rLEP-PGM在BHK-21细胞的生长滴度分别为4×106FFU/mL和2.5×106FFU/mL,在小鼠神经母细胞(NA)的生长滴度分别为4×107FFU/mL和2.5×107FFU/mL;嗜神经指数均为1;Western blot显示,rLEP-PGM在感染细胞的G蛋白表达量比LEP显著提高;小鼠感染试验显示,rLEP-PGM与LEP脑内注射小鼠的LD50分别为3 FFU和1 FFU,肌肉注射途径的LD50分别为4×104FFU和3.2×105FFU.[结论]P、M基因之间插入一个额外的G基因能够提高G蛋白的表达水平,同时增强重组病毒外周侵入中枢神经系统的能力.
反向遗传技术、狂犬病毒重组表达、糖蛋白、致病性
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Q933(微生物学)
国家科技重大专项2009ZX10004-214
2011-12-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1098-1105