Arg77和Glu80定点突变同时去除葡激酶中的T和B细胞抗原表位

摘要：

[目的]对葡激酶的T和B细胞抗原表位重叠的关键氨基酸Arg77和Glu80进行定点突变以降低葡激酶的免疫原性.[方法]基于Arg77和Glu80的溶剂可及表面积设计葡激酶的突变体;突变体在大肠杆菌DH5ct中进行表达.经过三步层析法纯化后,分析突变体的纤溶活性和免疫原性.[结果]免疫学实验提示,葡激酶导致Th2免疫反应;Glu80突变为丙氨酸和丝氨酸减少了溶剂可及表面积,同时去除了部分T和B细胞抗原表位;Arg77突变为天冬酰胺、谷氨酰胺和赖氨酸仅去除了部分T细胞抗原表位;6个组合突变体中,sak(R77Q/E80A)和Sak(R77Q/E80S)有效去除了部分B和T细胞抗原表位,降低了葡激酶的免疫原性;Sak(R770/E80A)and Sak(R77Q/E80S)的纤溶活性和催化效率与r-Sak相当.

关键词：葡激酶、T细胞抗原表位、B细胞抗原表位、免疫原性、蛋白质工程

所属期刊栏目：51

分类号：Q933(微生物学)

资助基金：河北师范大学应用开发基金2007K05

在线出版日期：2011-07-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：692-703