一株产右旋糖酐酶青霉的分离及酶的纯化和性质
[目的]从土壤中筛选到一株新的产右旋糖酐酶的真菌F1001,为酶法制备药用级右旋糖酐提供新的右旋糖酐酶产生菌株.[方法]通过形态特征和ITS rDNA序列分析方法鉴定菌株.利用硫酸铵盐析、Sepharose 6B凝胶柱纯化,得到纯度较高的酶蛋白.以右旋糖酐70 kDa为底物,对右旋糖酐酶酶学性质及催化机理进行研究.[结果]经过鉴定确定菌株F1001为棘孢青霉(Penicillium aculeatum).通过SDS-PAGE测得棘孢青霉右旋糖酐酶的分子量为66 kDa左右.酶促反应的最适温度为35"℃,最适pH为5.0,酶在pH 4.0-7.0和50℃以下稳定.酶的最适底物浓度为3%,酶催化水解右旋糖酐的主产物为异麦芽糖,确定该酶为内切右旋糖酐酶,并且只对连续的α-1,6葡萄糖苷键起作用.酶的Km值为3-55×10-5mol/L,vmax=4.29×10-2mol(葡萄糖)/min·L.Cu2+和Zn2+对酶活有较强的促进作用,低浓度的Cu2+使酶活力提高到134.7%,Mn2+对酶催化活力抑制作用较强.[结论]筛选得到一株新的右旋糖酐酶的产生菌F1001,产生的右旋糖酐酶活性高、稳定性较好.为该酶进行催化反应和工业应用提供了重要参数.
右旋糖酐酶、棘孢青霉、分离纯化、酶学性质
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Q814(生物工程学(生物技术))
安徽省长三角科技联合攻关项目10140702001;合肥工业大学大学生创新性实验计划项目CXSY10067
2011-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
495-503
