粤蓝链霉菌榴菌素生物合成基因orf20的功能
[目的]在大肠杆菌中,转录因子SoxR作为胞内氧化还原感应器,参与抗氧化胁迫的全局性调控.粤蓝链霉菌榴菌素生物合成基因簇内存在一个类soxR基因orf20,但其生理功能仍不清楚.[方法]将orf20基因在大肠杆菌中进行表达,分析携带重组质粒的大肠杆菌对百草枯抗性的变化.同时通过修改后的PCR-targeting方法构建粤蓝链霉菌orf20删除的突变株,分析突变株的表型变化和对百草枯抗性水平的变化.[结果]重组ORF20在羧基端含有组氨酸标签,并在大肠杆菌中获得可溶性表达,携带重组质粒pET28b-orf20的大肠杆菌对百草枯的抗性水平显著提高.粤蓝链霉菌orf20删除突变株仍具有产孢能力,生长特性没有改变,对百草枯的抗性水平也没有变化,但榴菌素的产量大幅提高,是野生株的3.3倍.[结论]在大肠杆菌中,orf20基因的编码产物能够被百草枯激活,替代SoxR参与抗氧化胁迫的调控.在粤蓝链霉菌中,orf20基因不参与抗氧化胁迫,而对榴菌素的产生有负调控效应.
粤蓝链霉菌、榴菌素、生物合成、orf20基因、转录因子SoxR
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Q933(微生物学)
科技部国际合作计划专项2008DFA31560;中国科学院知识创新工程重要方向项目KSCX2-YW-G-075-11;广东省科学院科技创新引导项目cx200702;广东省科学院青年基金qnjj20092
2011-06-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
402-409