非编码小RNA(sraB)调控肠炎型沙门菌的抗蛋清抑菌作用

摘要：

[目的]肠炎型沙门菌是一种食源性人畜共患病病原菌,可在禽蛋中存活并传播.sRNA为新近发现的基因表达调控分子,本实验以sRNA(sraB)为对象,探索sRNA与肠炎型沙门菌在禽蛋中存活的相关性,及研究其在细菌抵抗蛋清抑菌作用中的调控功能.[方法]参考已报道的沙门菌全基因组及sraB序列,设计并扩增sraB突变用基因片段,运用Red重组系统(red recombination system)对肠炎沙门菌野生株(SE2472)sraB基因进行定点敲除,构建出sraB敲除株(SE2472ΔsraB).分析比较sraB敲除对沙门菌在蛋清中存活的影响;另构建表达sraB的回复表达质粒pHDB3-sraB,将其转入sraB敲除株构建回复株SE2472AsraB-comp,以回复表达sraB,分析sraB表达对沙门菌敲除株的回复作用;并分别以野生株、敲除株及回复株研究sraB在抵抗蛋清中几种抑菌因子(如溶菌酶和卵转铁蛋白)作用中可能的调控作用.[结果]敲除株在蛋清中存活率为野生型的61%-70%,回复株相比野生型的存活率比敲除株提高10%-33%;在转铁蛋白抑菌实验中,孵育8 h和24 h,敲除株的存活率分别为野生型存活率的38%和23%,孵育8 h回复株相比野生型的存活率比敲除株提高15%,但孵育24 h回复株的存活率未见提高;在溶菌酶抑菌实验中,孵育8 h和24 h后,敲除株存活率分别为野生型的41%和27%,回复株相比野生型的存活率分别比敲除株提高35%和23%.[结论]通过比较sraB敲除与否,研究肠炎型沙门菌在禽蛋中的存活及对抑菌因子的抵抗作用,结果表明sraB在肠炎沙门菌抵抗蛋清抑菌作用中起着重要调控功能.

关键词：沙门菌、sRNA、基因调控、蛋清

所属期刊栏目：50

分类号：R37(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家杰出青年科学基金30988003

在线出版日期：2010-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1537-1544