重组GFP干酪乳杆菌的构建及其在小鼠肠道内的定植分布
[目的]研究重组干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)在小鼠肠道内定植能力及分布规律.[方法]利用绿色荧光蛋白(GFP)基因作为报告基因,构建pgsA基因与GFP的融合基因载体pLA-GFP,电转化到乳酸杆菌中,得到阳性重组菌.将重组菌以每只109mL-1的量,口服接种SPF级BALB/c小鼠,分别于口服后的1.5 h、3h、12 h、1d、3d、5d、6d、7d之后取其十二指肠、空肠、回肠、盲肠的肠道冲洗液,通过平板菌落计数法检测肠道内的重组干酪乳杆菌.[结果]Western blot结果显示约69 kDa的融合蛋白在乳酸菌中得到了正确的表达;重组菌在蓝紫光激发下,发出绿色荧光.小鼠口服重组菌后能在肠道黏膜的不同部位以一定的比例存活并附着在肠黏膜表面,口服6 d后达到定植高峰期,7 d后在十二指肠、空肠、回肠和盲肠定植率分别占第1天的16.49%、25.08%、47.71%、41.03%.[结论]GFP在干酪乳杆菌中得到了稳定的表达,且在小鼠肠道内具有良好的定植能力,定植规律回肠>盲肠>空肠>十二指肠,这为研究乳酸杆菌作为口服疫苗抗原递送载体及其对小鼠肠道免疫机理提供试验基础.
干酪乳杆菌、绿色荧光蛋白、肠道、定植
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R392
国家人事部留学回国人员科技项目择优资助项目
2010-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1232-1238
