一种构建马链球菌兽疫亚种血红素受体基因缺失突变株的方法

摘要：

[目的]探讨一种构建马链球菌兽疫亚种基因缺失突变株的方法.[方法]PCR扩增目的基因,用pJR700温度敏感载体系统,构建目的基囚载体;反向PCR扩增目的基因缺失载体片段,连接,产生目的基因缺失载体;电转化缺失重组质粒导入感受态细胞,先在37℃卡拉霉素(kan)培养基中连续培养,然后在30℃不含kan液体培养基中传代,挑取抗生素敏感菌落,PCR扩增检测抗生素敏感菌染色体上目的基因片段和链黑霉素抗性实验确认血红素受体基因缺失.[结果]获得不含抗生素基因的马链球菌兽疫亚种血红素受体基因缺失突变株.[结论]用pJR700温度敏感载体系统,构建马链球菌兽疫亚种基因缺失突变株是可行的.

关键词：温度敏感质粒、血红素受体基因、缺失突变株、马链球菌兽疫亚

所属期刊栏目：50

分类号：Q93-3(微生物学)

资助基金：西南交通大学科研启动基金X1200512470141;中央高校基本科研业务费专项基金SWJTU092T28

在线出版日期：2010-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：822-827