球孢白僵菌高渗适应性相关基因Bbmpd的克隆与表达分析
[目的]克隆与球孢白僵菌(Beauveria bassiana)的高渗适应性相关基因,并对其功能进行分析,以揭示球孢白僵菌对高渗等逆境适应的分子机理.[方法]利用YADE法克隆T-DNA的侧翼序列并进行基因组步行,获得突变基因的全长及上游序列;利用Rt-PCR技术分析突变基因的表达特性以及与Bbhogl的关系;采用同源重组技术敲除Bbmpd基因.[结果]克隆得到插入突变基因及其上、下游序列全长3037 bp.该基因与编码球孢白僵菌的1-磷酸甘露醇脱氢酶基因相似性为98%.Bbmpd的表达受高渗环境(0.8 mol/L NaCl)的诱导,受Bbhog1信号途径的激活调节,Bbhog1缺失导致Bbmpd表达下调.Bbmpd缺失突变体在高渗胁迫下的生长受到明显抑制.Bbmpd缺失不影响球孢白僵菌在查氏培养基上的生长和产孢.[结论]由T-DNA 突变体克隆了编码球孢白僵菌1-磷酸甘露醇脱氢酶基因Bbmpd,该基因的表达受高渗环境的诱导和Bbhog1的调控,与球孢白僵菌高渗适应性相关.
球孢白僵菌、1-磷酸甘露醇脱氢酶、高渗胁迫、YADE
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Q933(微生物学)
国家高技术研究发展计划863计划2006AA10A212;重庆市自然科学基金CSTC2009BB1125;西南大学博士科研启动基金SWUB2008072
2010-07-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
724-728