牛凝乳酶原基因在乳酸乳球菌中的表达
[目的]利用乳酸乳球菌nisin诱导基因表达系统(the Nlsin Controlled gene Expression system,NICE)表达牛凝乳酶原.[方法]从克隆载体pS19-PPC中获得牛凝乳酶原基因,将该基因与表达载体pNZ8148连接并电转化乳酸乳球菌NZ9000,转化子经酶切、PCR和测序鉴定后,用nisin进行诱导表达,表达产物利用SDS-PAGE和Western blot鉴定,表达产物纯化后检测凝乳活性.[结果]重组牛凝乳酶原与天然牛凝乳酶原比较,其分子量大小、免疫性质、生物活性和抑制剂敏感性没有发现显著差异,其凝乳活性可达2 × 10~3 IMCU/mL.[结论]在乳酸乳球菌中表达了具有凝乳活性的牛凝乳酶原,同时乳酸乳球菌作为发酵剂和凝乳酶产生菌双重角色的实现,为奶酪加工提供了新思路和新方法.
牛凝乳酶原、乳酸乳球菌、蛋白印迹、凝乳活性
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Q814(生物工程学(生物技术))
国家高技术研究发展计划863计划2008AA10Z311;黑龙江省科技厅攻关项目GB088403
2010-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
628-633
