猪链球菌谷氨酰胺tRNA合成酶的原核表达产物的小鼠免疫试验

摘要：

[目的]猪链球菌谷氨酰tRNA合成酶(Glutamyl tRNA Synthetase,GtS)是一种催化谷氨酰胺与对应的tRNA发生酯化反应形成谷氨酰tRNA的蛋白酶.本研究通过小鼠免疫保护力实验来评价Gts的免疫原性.[方法与结果]使用clustaIX对GenBank中链球菌属的GtS进行同源性分析,结果显示GtS的氨基酸序列在链球菌属内同源性达到95%以上.利用原核表达系统在大肠杆菌BL21中表达(His)_ 6-GtS融合蛋白.SDS-PAGE和Western blot结果表明该融合蛋白在BL21菌株中高效表达,并且具有良好的免疫原性.融合蛋白经过组氨酸标签纯化试剂盒(Novagen)纯化后获得纯度为93.3%、浓度为433μg/mL的重组蛋白rGtS.在小鼠免疫保护试验中,使用rGtS混合弗氏佐剂免疫Balb/c小鼠.免疫过后用4倍LD_(50)剂量的SC19菌株(1.2×10~9CFU)攻毒,rGtS免疫组小鼠的存活率达50%(4/8),高于空载体对照(1/8).[结论]本研究证实rGtS融合蛋白具有良好免疫原性,能够提供部分的保护,是一种非常有潜力的亚单位疫苗候选蛋白.

关键词：猪链球菌、谷氨酰胺tRNA合成酶、免疫原性

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分类号：Q392(人类遗传学)

资助基金：国家公益性农业行业科研专项200803020;国家科技攻关项目的资助2006BAD06A18-2

在线出版日期：2010-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：418-422