委内瑞拉链霉菌秦岭变种属间接合转移系统的构建及透明颤菌血红蛋白的表达
[目的]构建委内瑞拉链霉菌秦岭变种属间接合转移系统及透明颤菌血红蛋白的表达.[方法]以链霉菌广泛使用的整合型质粒pSET152和复制型pHZ1358为出发质粒,通过供体大肠杆菌(Escherichia coli)ET12567(pUZ8002)进行属间接合转移委内瑞拉链霉菌秦岭变种.[结果]确定了该变种的最佳接合转移条件;通过SOE-PCR(Splicing by overlap extension PCR)技术构建含Perm E和vhb结构基因融合片段的整合型表达载体pJD100,转化ET12567(pUZ8002)后属间接合转移委内瑞拉链霉菌秦岭变种.通过PCR和CO结合差光谱验证了vhb基因在委内瑞拉链霉菌秦岭变种中的整合表达.[结论]本文首次探索了委内瑞拉链霉菌秦岭变种接合转移系统,确定了委内瑞拉链霉菌秦岭变种的最佳接合转移条件,并采用基因工程手段使vhb基因在委内瑞拉链霉菌秦岭变种中获得表达.
委内瑞拉链霉菌秦岭变种、接合转移、vhb基因、CO结合差光谱
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Q786(基因工程(遗传工程))
国家高技术研究发展计划863计划2007AA021503;西北农林科技大学校科研和教改项目B07049
2010-05-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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