镇江香醋固态发酵醋醅中微生物总DNA提取方法比较

摘要：

[目的]为了更加全面地分析我国传统固态发酵过程中微生物群落的多样性和演替情况,本文以镇江香醋固态发酵为例,对比研究了11种不同的总DNA提取法对醋醅中总DNA提取的影响.[方法]使用紫外分光光度计法和荧光定量PCR(Real time Quantitative PCR)测定了不同提取方法得到的醋醅样品总DNA的产量与纯度,采用变性梯度凝胶电泳(DGGE)法对固态发酵中细菌和真菌的多样性进行了分析.[结果]醋醅总DNA得率最高可达93.2±1.5 μg/g干醅,细菌总数最高达到1.73×10~(13) copies·(g干醅)~(-1),真菌总数最高达到6.49×10~(12) copies·(g干醅)~(-1).不同的提取方法对DGGE结果有明显的影响,6种基于SDS裂解的方法所获得的条带较多.[结论]结果表明,液氮研磨+溶菌酶+SDS高盐抽提法(方法3)为最优的醋醅总DNA提取方法.

关键词：食醋固态发酵、DNA提取、荧光定量PCR、变性梯度凝胶电泳

所属期刊栏目：50

分类号：Q93(微生物学)

资助基金：国家863前沿探索项目2007AA02Z203;国家科技支撑计划2006BAD27B09-3;2008BA163B06;教育部新世纪优秀人才支持计划NCET-07-0380;江南大学食品科学与技术国家重点实验室目标导向课题SKLF-MB-200801

在线出版日期：2010-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：119-125