近岸污染指示半知菌灰黄青霉(Penicillium griseofulvum)的分子检测
[目的]通过分子方法检测近海污染环境优势种灰黄青霉,并为由此而推断污染程度做准备.[方法]根据GenBank中青霉属不同种和相近属种的ITS序列差异和灰黄青霉特有的IAO序列,设计了污染区优势种灰黄青霉的特异性引物AS1/RS4和IAO1/IAO2,建立相应的特异探针检测体系.通过PCR和套式PCR技术,分析比较两对特异序列检测灰黄青霉的差异.[结果]建立的分子检测体系可以排除其它近似或相关菌株干扰,从环境中扩增到目的基因片段.利用引物AS1/RS4作为核酸探针,通过套式PCR菌株DNA的检测灵敏度可达到10 fg/μL,当仅有10个数量级分生孢子时即可检测出,从沉积物中检测灵敏度为10~2个数量级孢子/0.25 g.特异酶基因IAO1/IAO2检测灵敏度较前者稍低.[结论]利用特异序列作为探针检测污染环境优势种灰黄青霉的方法可行,在一定范围内,灰黄青霉的出现频率及数量对污染程度有较好的指示作用.
近海污染、灰黄青霉、分子检测
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Q959(动物学)
国家自然科学基金40776098;40976104;国家高技术研究发展计划863计划2007AA09Z435;2007AA091507;2008AA09Z407
2010-03-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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