高温链霉菌质粒pTSC2的测序分析和滚环复制方式的鉴定
从猪粪堆肥中分离到一株编号为X3-3的可以在50℃高温生长的链霉菌菌株,该菌株含有一个约7 kb的环型质粒pTSC2.[目的]克隆、测序和分析pTSC2,以及鉴定质粒的复制方式.[方法]利用分段克隆和引物延伸获得pTSC2的全序列,利用多序列比对寻找复制元件rep、dso和sso,利用中性转移和Southern杂交检测复制中间体.[结果]克隆和测序获得了全长为7516 bp的pTSC2序列,预测编码8种蛋白,其中4种蛋白与链霉菌滚环复制的质粒pIJl01中负责复制和接合转移的蛋白非常相似.pTSC2的复制元件rep、dso和SSO也与pIJ101的相似.克隆、转化变铅青链霉菌ZX7以及高温链霉菌2C证明了rep和dso为复制所必需元件.Southern杂交检测到pTSC2复制过程中积累了大量的单链DNA.[结论]高温链霉菌质粒pTSC2以滚环方式进行复制.这是首次在高温链霉菌中克隆和测序质粒,以及鉴定其复制方式.
高温链霉菌、质粒、测序、滚环复制
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Q933(微生物学)
国家自然科学基金30870067;30770045;30325003;国家高技术研究发展计划863计划2007AA021503;中国科学院知识创新工程项目KSCX--YW-G-014
2010-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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