抗黄曲霉毒素B1单链抗体在大肠杆菌中的表达及优化

摘要：

[目的]继杂交瘤技术后,重组抗体技术是新一代的抗体制备技术.然而如何用原核系统中较多地表达具有生物活性的单链抗体,避免包涵体形成仍是一个需要探讨的问题.[方法]将目的基因scFv-H4克隆到载体pET22b上,分别转入大肠杆菌BL21(DE3)和Origami(DE3)中,通过改变诱导温度和IPTG浓度,比较具有生物活性的蛋白量以及包涵体的量.[结果]在BL21(DE3)中,pET22b能产生大量表达scFv-H4,而BL21(DE3)的含有trxA和gor双突变的衍生菌Origami(DE3)表达的scFv-H4的总量较少,但是具有生物活性的蛋白量较多(35 mg/L培养物),具有生物活性的蛋白比例也较BL2l(DE3)高.另外IFrG的浓度对scFv-H4表达没有显著影响,而较高的诱导温度会促使表达的蛋白形成包涵体.[结论]在较低的温度下,pET22b能在Origami(DE3)能较好地表达具有生物活性的scFv-H4,减少包涵体的比例,为后续的抗体性质研究和改造奠定了基础.

关键词：黄曲霉毒素、单链抗体、表达、BL21(DE3)、Origami(DE3)、pET22b

所属期刊栏目：49

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：教育部新世纪优秀人才支持计划NCET-06-0482

在线出版日期：2009-09-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：880-888