10.3321/j.issn:0001-6209.2009.05.008
重组β-葡萄糖苷酶生产龙胆低聚糖的工艺条件优化
[目的]β-葡萄糖苷酶可用于酶法生产龙胆低聚糖.为了给龙胆低聚糖的生产提供大量的酶来源,构建基因工程菌表达黑曲霉(CMI CC 324626)β-葡萄糖苷酶基因(bgl)并研究重组酶生产龙胆低聚糖的工艺条件.[方法]将bgl克隆到表达载体pPIC9K,转化毕赤酵母(Pichia pastoris)KM71.表达产物通过.HPLC和LC-MS鉴定了其可用于生产龙胆低聚糖的转苷活性,并对酶转化葡萄糖生产龙胆低聚糖的反应条件进行了优化.[结果]实现了β-葡萄糖苷酶的过量表达.当底物葡萄糖浓度为80%,反应pH4.5,温度为60℃,加酶量为每克葡萄糖60 U,添加1 mmol/L的K+转化周期为48 h,龙胆低聚糖累计达到最大为50 g/L.[结论]本研究是国内外首次利用重组酶酶法生产龙胆低聚糖的报道.
龙胆低聚糖、酶转化、β-葡萄糖苷酶、表达、毕赤酵母
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Q814(生物工程学(生物技术))
国家杰出青年科学基金20625619;国家重点实验室科研基金SKLF-MB-200802
2009-06-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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