专一性PCR和变性梯度胶电泳协助从焦化废水处理装置中分离优势功能菌Thauera属菌株

摘要：

[目的]在专一性PCR和变性梯度胶电泳(DGGE)的协助下,从废水处理装置的微生物群落中分离较难分离的功能菌Thauera.[方法和结果]本研究首先使用升Thauera特异性PCR-DGGE的方法鉴定了焦化废水处理装置反硝化池生物膜中的Thauera在6种培养基、好氧获氧条件下的生长情况.挑选Thauera多样性较高的培养基1/10NB与MMQ在好氧条件下进行分离培养.然后使用Thauera特异性PCR方法确定分离得到的菌落是否呈阳性,并使用DGGE的方法检验其是否为纯菌.使用不同培养基对含有介Thauera的混合菌落进行进一步纯化,DGGE检测发现MMP培养基对混合细菌菌落Q20中的Thauera有明显的富集作用.经过介.Thauera特异性PCR结合DGGE检测对升.Thauera属细菌进行追踪,将混合菌落在MMP培养基上多次划线,最终分离得到纯菌.通过这种方法,从反硝化池样品中分离获得了3株在样品中最为主要的Thauera菌株.[结论]以特异性分子标记为导向分离培养细菌,不仅提高了分离效率及细菌筛选的灵敏度,还能协助分离常规方法难以分离的细菌.

关键词：Thauera、特异性PCR、变性梯度凝胶电泳(DGGE)、分离纯化

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分类号：Q938(微生物学)

资助基金：国家自然科学基金20677041;国家"863计划"重点项目2007AA021301;上海市国际合作项目05SR07107;上海市重点学科建设项目资助B203

在线出版日期：2009-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1634-1641