猪源A组轮状病毒重组质粒pW425et-Vp7在乳酸菌中的表达及免疫原性分析

摘要：

[目的]在乳酸菌中表达猪源A组轮状病毒重组质粒pW425et-Vp7,并检测其抗原性,为进一步制备猪轮状病毒乳酸菌疫苗奠定基础.[方法]摸索电转化条件,将已构建的重组质粒pW425et-Vp7转化至thyA基因缺陷型的嗜酸乳杆菌中.筛选阳性克隆,采用SDS-PAGE和Westernblot检测其表达情况.并将BALB/c小鼠口服免疫该重组菌,间接ELISA检测其免疫原性.另外,给免疫后小鼠攻以纯化的猪轮状病毒(蛋白含量15 mg/mL),初步检测该重组菌的免疫保护作用.[结果]Vp7基因在乳酸菌中获得表达,大小约40.77 kDa,且该蛋白可与猪轮状病毒抗体反应,具有反应原性.ELISA检测小鼠肠黏膜样品结果显示免疫后小鼠能产生明显的抗轮状病毒SIgA抗体,表明该重组菌具有较好的免疫原性.且攻毒后,免疫组仅23%的小鼠发生腹泻,初步证明该重组菌对猪轮状病毒的攻击具有较好的保护作用.[结论]在乳酸菌中成功地表达了猪轮状病毒Vp7基因,制备了猪轮状病毒Vp7重组乳酸菌,该重组菌具有较好的抗原性,初步证明其作为疫苗的可行性.

关键词：猪轮状病毒、电转化、乳酸菌、表达、免疫原性

所属期刊栏目：48

分类号：R37(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家"863计划"2003AA24112002、2006AA10A205,2007AA10Z322;国家自然科学基金0200199、30671573;吉林省科技厅项目20020220

在线出版日期：2008-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1514-1519