基于响应面分析方法的钩端螺旋体三联属特异性蛋白抗原原核表达条件的优化

摘要：

脂蛋白LipL32和LipL21及穿膜蛋白OMPL1是问号钩端螺旋体(简称钩体)属特异性表面抗原,可作为通用型钩体基因工程疫苗抗原.[目的]在我们的研究中,为了获得使得重组人工融合基因lipL32/1-lipL21-ompL1/2获得较高的表达水平,我们优化了重组宿主大肠杆菌的表达条件.[方法]我们采用了基于中心复合设计(CCD)的响应面分析方法(RSM).影响重组大肠杆菌生长的主要因素包pH、诱导剂IPTG浓度、诱导前培养实践、诱导时间以及诱导温度.响应面分析方法可以从这些因素中找到适合目的蛋白表达的最优表达条件.[结果]我们的结果显示在pH7.9、0.20mmol/LIPTG、诱导前培养时间2.5 h、诱导时间5.83 h、诱导后温度31℃条件下,可获得目的重组蛋白37.78 mg/L的最大表达量.[结论]实验结果表明采用基于中心复合设计的响应面分析方法能够较吹靥岣吣康牟锏牟?利用统计方法不但可以减少试验的次数,而且还能够从影响蛋白的因素中找出最重要的影响因素,因此该方法不仅对重组蛋白表达条件的优化有用,而且是一种很好的筛选方法.

关键词：问号钩端螺旋体、原核表达、响应面分析、表达条件的优化

所属期刊栏目：48

分类号：Q93-3(微生物学)

资助基金：浙江省科技计划国际合作重点项目2006C24003

在线出版日期：2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：893-899