线粒体型蛋白frataxin在家蚕微孢子虫中的鉴定与分析

摘要：

[目的]Frataxin是铁硫簇相关蛋白,在线粒体代谢中起着重要作用.分析家蚕微孢子中该蛋白的结构特征,系统进化关系以及在孢子体内的转录翻译活性.[方法]基于家蚕微孢子全基因组序列,同源序列搜索获得该基因序列.进行蛋白二级结构比较,近缘物种共线性特征分析及系统进化树构建.此外构建pGEX-4T-1-Nbfra原核重组表达载体,转化E coli BL21(DE3)进行目的蛋白表达纯化,以此为抗原免疫小鼠,制备抗体,并与家蚕微孢子总蛋白进行Western免疫杂交.[结果]Nbfra蛋白缺乏进入线粒体的信号序列,功能区缺乏部分α-螺旋;frataxin基因在不同微孢子基因组中的分布具有共线性特征,表明其在基因组进化中非常保守.系统进化分析显示微孢子形成独立进化支,并且与高等真核生物近缘,说明微孢子在进化地位上比其它原虫更加高等,支持了微孢子虫是真菌的姊妹枝的进化地位假说.[结论]免疫杂交结果表明Nbfra基因家蚕微孢子虫中能正常表达与翻译.本研究为微孢子的分类地位及线体假说提供了重要的补充依据.

关键词：Frataxin、共线性、家蚕微孢子虫、微孢子

所属期刊栏目：48

分类号：S884.21(蚕桑)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2005CB121003;重庆市科技攻关项目CSTC;2006AA5019;国家茧丝绸发展风险基金M012005-000Y-00070;高等学校学科创新引智计划项目B07045

在线出版日期：2008-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：608-615