FMDV 3C蛋白酶基因的克隆及在昆虫细胞中的表达

摘要：

口蹄疫病毒3C蛋白酶在病毒的致病机理、聚蛋白前体的加工和RNA的复制上起着很重要的作用,是当前抗病毒研究的一个重要靶点.本研究从Asia Ⅰ型FMDV适应细胞毒中提取RNA,用RT-PCR技术扩增3C基因,首先克隆到pGEM-T载体,再亚克隆到杆状病毒转移载体pMelBac B中,构建出重组转移载体pMel-3C.最后将含有目的基因的转移载体与线性化的杆状病毒DNA共转染Sf9细胞,通过噬斑筛选和PCR鉴定,获得了重组杆状病毒.重组病毒经扩增后以10个MOI感染Sf9细胞,接种病毒72 h后收获细胞,样品经SDS-PAGE和Western blot证实3C蛋白获得表达,分子量约23kDa,与预测蛋白大小一致,且能被FMDV感染阳性血清所识别.本研究为空衣壳的体外组装及新型抗病毒药物设计的研究奠定了基础.

关键词：FMDV、3C蛋白酶基因、Sf9细胞、杆状病毒、表达

所属期刊栏目：48

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2005CB523201

在线出版日期：2008-06-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：312-316